Factor







Factor-faktor yang mempengaruhi fluoresensi adalah :
1. Temperatur (Suhu)
EF berkurang pada suhu yang dinaikkan
Kenaikan suhu menyebabkan tabrakan antar mol atau dengan mol pelarut
Energi akan dipancarkan sebagai sinar fluoresensi diubah menjadi bentuk lain misal : EC
2. Pelarut
Dalam pelarut polar intensitas fluoresensi bertambah,
Jika pelarut yang digunakan mengandung atom-atom yang berat (CBr 4, C2H5I) maka
intensitas fluoresensi berkurang, sebab ada interaksi gerakan spin dengan gerakan orbital
elektron ikatan  mempercepat LAS maka intensitas menjadi berkurang
3. pH mempengaruhi keseimbangan bentuk molekul dan ionic
4. Adanya oksigen terlarut dalam larutan cuplikan menyebabkan intensitas fluoresensi
berkurang sebab oksigen terlarut oleh pengaruh cahaya dapat mengoksidasi senyawa yang
diperiksa dan oksigen mempermudah LAS
5. Kekakuan struktur (structural rigidity) Struktur yang rigid (kaku) mempunyai
intensitas yang tinggi.
1. Temperatur (Suhu)
a. EF berkurang pada suhu yang dinaikkan
b. Kenaikan suhu menyebabkan tabrakan antar mol atau
dengan mol pelarut
c. Energi akan dipancarkan sebagai sinar
fluoresensi diubah menjadi bentuk lain misal : EC
2. Pelarut
a. Dalam pelarut polar intensitas fluoresensi bertambah,
karena dalam pelarut polar
b. Jika pelarut yang digunakan mengandung atom-atom
yang berat (CBr4, C2H5I) maka intensitas fluoresensi
berkurang, sebab ada interaksi gerakan spin dengan
gerakan orbital elektron ikatan

à mempercepat LAS

maka intensitas menjadi berkurang
3. pH
pH mempengaruhi keseimbangan bentuk molekul dan

ionic
4. Oksigen terlarut
Adanya oksigen terlarut dalam larutan cuplikan
menyebabkan intensitas fluoresensi berkurang sebab :
a. Oksigen terlarut oleh pengaruh cahaya dapat
mengoksidasi senyawa yang diperiksa
b. Oksigen mempermudah LAS
5. Kekakuan struktur (structural rigidity) Struktur yang rigid (kaku)
mempunyai intensitas yang tinggi

Factors Affecting Fluorescence

Bonds
Fluorescence is seldom observed at  < 250nm because the absorbed
energy causes predissociation or dissociation.
Recall  n
* and n
* and  
* are < 250nm, therefore 
* are the excitation transitions. Since  
* >  n
* by 100 to 1000
the transition probability of a 
* or *
 is > n
* and *
n.
Therefore, fluorescence is more commonly associated with  and *
states.
Structure
Most aromatic compounds exhibit fluorescence.
Ring substitution shifts  of fluorescence and intensity.
Electron withdrawing groups on the ring decrease fluorescence.
Structural rigidity increases fluorescence intensity.

Temperature
Increased temperatures increases external conversion, lowering the  F.
Solvent
Decreased viscosity increases external conversion, lowering  F.
Solvents containing heavy atoms increases  P at the expense of  F.

Sometime, polar solvents decrease energy of 
thus increasing  F.

* below n

*,

pH
Aromatic compounds with acidic or basic ring substituents have pH
dependent  F.
Dissolved O2
The paramagnetic properties of O2 promote intersystem crossing to T1.
Concentration
Fluorescence is proportional to concentration.

F = k'(Po-P)
A = - log(P/Po) =  bc
P = Po 10- bc
F= k' Po (1 - 10- bc)
F= k' Po [2.3  bc - (-2.3  bc )2/2! - (2.3  bc )3/3! ....]
for A =  bc < 0.05 all but the first term is negligible.
F = 2.3 k'  bc Po
F = kc

Slide 1
Mentions: As a non-contact and non-destructive method, fluorescence
thermometry has been used in numerous thermal imaging applications during
the last decade, ranging from MEMS devices (e.g. microelectronic circuits) to

single living cell (6, 34). The temperature is determined by analyzing the
temperature-dependent fluorescence signal: when the temperature increases,
the intensity of excited fluorescence decreases and the peak shifts to longer
wavelength (35). Therefore, the phosphor exciting fluorescence signal can act as
temperature sensor, and its size determines the spatial resolution of temperature
measurement. The work by Li et al. (36) described the temperature
measurement technique by using the wavelength shift of individual CdSe
quantum dots with nominal diameter of 7–12 nm. Similar work has been done by
Bastida et al. (37) in the fabrication of temperature sensors by using two types of
quantum dots with 4 nm and 5 nm. Fig. 2 shows the relationship between
temperature and fluorescence signal of single quantum dots (36). It is obvious
that the fluorescence peak decreases and shifts to longer wavelength while the
peak width broadens as temperature goes up. The temperature can be readily
determined from linear relationship between temperature and wavelength,
intensity and peak width.

Menyebutkan: Sebagai non-kontak dan metode non-destruktif, fluoresensi
thermometry telah digunakan dalam berbagai aplikasi thermal imaging selama
dekade terakhir, mulai dari perangkat MEMS (misalnya sirkuit mikroelektronik) ke
sel hidup tunggal (6, 34). Suhu ditentukan dengan menganalisis bergantung
pada suhu sinyal fluoresensi: ketika suhu meningkat, intensitas fluoresensi
bersemangat menurun dan bergeser ke puncak panjang gelombang yang lebih
panjang (35). Oleh karena itu, fosfor sinyal fluoresensi menarik dapat bertindak
sebagai sensor suhu, dan ukurannya menentukan resolusi spasial pengukuran
temperatur. Karya oleh Li et al. (36) menggambarkan teknik pengukuran suhu
dengan menggunakan pergeseran panjang gelombang dari titik-titik kuantum
CdSe individu dengan diameter nominal 7-12 nm. Kerja sama telah dilakukan
oleh Bastida et al. (37) dalam pembuatan sensor suhu dengan menggunakan
dua jenis titik-titik kuantum dengan 4 nm dan 5 nm. Gambar. 2 menunjukkan
hubungan antara temperatur dan sinyal fluoresensi titik-titik kuantum tunggal
(36). Hal ini jelas bahwa penurunan puncak fluoresensi dan bergeser ke panjang
gelombang yang lebih panjang, sementara lebar puncak memperluas suhu naik.
Suhu dapat segera ditentukan dari hubungan linear antara temperatur dan
panjang gelombang, intensitas dan lebar puncak.
Slide 2
Dalam larutan, molekul pelarut sekitar fluorophore keadaan dasar memiliki dipol
momen yang dapat berinteraksi dengan momen dipol dari fluorophore untuk
menghasilkan distribusi memerintahkan molekul pelarut sekitar fluorophore
tersebut. Perbedaan tingkat energi antara tanah dan keadaan tereksitasi di
fluorophore yang menghasilkan perubahan momen dipol molekul, yang akhirnya
menyebabkan penyusunan kembali sekitar molekul pelarut. Namun, prinsip
Franck-Condon menyatakan bahwa, setelah eksitasi fluorophore sebuah, molekul
sangat tertarik untuk tingkat energi elektronik yang lebih tinggi dalam jangka
waktu yang jauh lebih pendek dari yang dibutuhkan untuk fluorophore dan

molekul pelarut untuk kembali menyesuaikan diri dalam pelarut-zat terlarut
lingkungan yang interaktif. Akibatnya, ada penundaan waktu antara peristiwa
eksitasi dan re-pemesanan molekul pelarut sekitar fluorophore terlarut (seperti
digambarkan pada Gambar 1), yang umumnya memiliki momen dipol yang jauh
lebih besar di negara bersemangat daripada dalam keadaan dasar .

Setelah fluorophore telah bersemangat untuk tingkat getaran yang lebih tinggi
dari yang pertama keadaan singlet bersemangat (S (1)), energi getaran berlebih
cepat hilang sekitar molekul pelarut sebagai fluorophore perlahan rileks ke
tingkat energi terendah vibrasi (terjadi dalam waktu picosecond skala). Molekul
pelarut membantu dalam menstabilkan dan selanjutnya menurunkan tingkat
energi keadaan tereksitasi dengan re-berorientasi (relaksasi pelarut disebut)
sekitar fluorophore bersemangat dalam proses lambat yang membutuhkan
antara 10 dan 100 picoseconds. Ini memiliki efek mengurangi pemisahan energi
antara tanah dan keadaan tereksitasi, yang menghasilkan pergeseran merah
(panjang gelombang lebih panjang) dari emisi fluoresensi. Meningkatkan
polaritas pelarut menghasilkan pengurangan Sejalan lebih besar di tingkat energi
keadaan tereksitasi, sedangkan penurunan polaritas pelarut mengurangi efek
pelarut pada tingkat energi keadaan tereksitasi. Polaritas fluorophore juga
menentukan sensitivitas dari negara bersemangat untuk pelarut efek. Polar dan
fluorophores dikenakan pameran efek yang jauh lebih kuat dari fluorophores nonpolar.

Efek relaksasi pelarut pada fluoresensi dapat menimbulkan dampak yang
dramatis pada ukuran pergeseran Stokes. Sebagai contoh, bagian indol
heterosiklik dari asam amino triptofan yang biasanya berada pada bagian
hidrofobik dari protein dimana polaritas relatif dari media sekitarnya rendah.
Setelah denaturasi protein tuan rumah khas dengan panas atau bahan kimia,
lingkungan residu triptofan berubah dari non-polar untuk yang sangat polar
seperti cincin indole muncul ke dalam larutan berair sekitarnya. Emisi fluoresensi
meningkat pada panjang gelombang dari sekitar 330-365 nanometer,
pergeseran 35-nanometer karena pelarut efek. Dengan demikian, spektrum
emisi dari kedua probe neon intrinsik dan ekstrinsik dapat digunakan untuk
menyelidiki efek pelarut polaritas, asosiasi molekul, dan pembentukan kompleks
dengan molekul kecil polar dan non-polar dan makromolekul.

Slide 3
Our as prepared graphene oxide suspension was mildly acidic (pH 5.2) due to
traces of acid remaining from the synthesis (see Methods). Emission measured
with 440 nm excitation at this pH showed a broad peak (FWHM > 200nm)
centred near 668 nm (Fig. 1a), similar to spectra previously reported9, 10, 11,
18. As pH was increased from highly acidic (pH 1.7) toward neutral values, we

observed a monotonic decrease in the intensity of this emission peak, with no
significant change in shape (Fig. 1a). Increasing pH in the basic range above pH 7
led to the disappearance of the 668 nm feature and the appearance of two
relatively sharp peaks near 482 nm (~16 nm FWHM) and 506 nm (~26 nm
FWHM) (Fig. 1b). By simulating the set of emission spectra as superposition of
five Gaussian components, we deduced corrected peak wavelengths of 479, 506,
531, 577, and 683 nm (with significant uncertainties in the peak positions of the
broad 577 and 683 nm features). (Fig. S-3) A plot of deduced amplitudes of the
three major peaks (479, 506, and 683 nm) vs. pH shows that the acidic (683 nm)
peak decreases in intensity smoothly and almost monotonically from pH 1.7 to
12.7, while the two basic peaks (479 and 506 nm) emerge abruptly in the narrow
pH range between 7.6 to 8.0, as in a fluorimetric titration (Fig. 1c). The observed
changes in fluorescence spectra were completely reversible with pH within the
measured range, indicating no loss of oxygen species.19

Sebagai siap suspensi graphene oksida kami agak asam (pH 5.2) karena jejak
asam yang tersisa dari sintesis (lihat Metode). Emisi diukur dengan 440 nm
eksitasi pada pH ini menunjukkan puncak luas (FWHM> 200nm) berpusat di
dekat 668 nm (Gambar. 1a), mirip dengan spectra sebelumnya reported9, 10,
11, 18. Sebagai pH meningkat dari sangat asam (pH 1,7 ) terhadap nilai-nilai
yang netral, kami mengamati penurunan monoton dalam intensitas puncak emisi
ini, dengan tidak ada perubahan yang signifikan dalam bentuk (Gambar. 1a).
Meningkatkan pH dalam kisaran dasar di atas pH 7 menyebabkan hilangnya fitur
668 nm dan munculnya dua puncak yang relatif tajam dekat 482 nm (~ 16 nm
FWHM) dan 506 nm (~ 26 nm FWHM) (Gambar. 1b). Dengan simulasi set emisi
spektrum sebagai superposisi dari lima komponen Gaussian, kami menyimpulkan
dikoreksi panjang gelombang puncak 479, 506, 531, 577, dan 683 nm (dengan
ketidakpastian yang signifikan dalam posisi puncak luas 577 dan 683 fitur nm).
(Gambar. S-3) Sebuah plot amplitudo dideduksi dari tiga puncak utama (479,
506, dan 683 nm) vs pH menunjukkan bahwa asam (683 nm) penurunan puncak
intensitas lancar dan hampir monoton dari pH 1,7-12,7 , sedangkan dua puncak
dasar (479 dan 506 nm) muncul tiba-tiba dalam kisaran sempit antara pH 7,68,0, seperti dalam sebuah titrasi fluorimetric (Gambar. 1c). Perubahan yang
diamati pada spektrum fluoresensi benar-benar reversibel dengan pH dalam
kisaran terukur, menunjukkan tidak ada kehilangan spesies oksigen