Rancangan Injeksi Epinefrin

Published on January 2017 | Categories: Documents | Downloads: 101 | Comments: 0 | Views: 889
of 25
Download PDF   Embed   Report

Comments

Content

INJEKSI EPINEFRIN

I.

Bahan Baku (Epinefrin Bitartrat)

C9H13NO3.C4H6O6

BM 333,29

Epinefrina bitartat mengandung tidak kurang dari 99,0% C9H13NO3.C4H6O6, dihitung
terhadap zat anhidrat



Pemerian
Kelarutan




tidak larut dalam kloroform P, dan dalam eter P.
Kejernihan larutan
: Larutkan 40mg dalam 2 mL air larutan jernih.
Keasaman-kebasaan : pH larutan 5,0% b/v, 3,0 sampai 4,0.

: serbuk hablur, putih hingga putih kelabu, tidak berbau.
: larut dalam 3 bagian air, sukar larut dalam etanol (95%) P, praktis

(FI III 1979, Hal : 239)


Spektra UV

Epinephrine pada pelarut methanol absorbsi maksimumnya pada panjang gelombang
282 nm, dan pada 0,1 M Hcl absorbsi maksimumnya pada panjang gelombang 282
nm. ( Uv and IR Spectra, 2002)

Epinefrin dilaporkan (8, 9) memiliki karakteristik penyerapan ultraviolet berikut
dalam air : (Florey, 1978).





Spektrum IR

Bilangan
gelombang cm-1
3650-3580

Gugus fungsi

3500-3310

Amina sekunder

3000-2700

-CH3, -CH2

1675-1500

aromatik

Alcohol

Spektrum Fluoresensi (Florey, 1978)
Pengukuran fluoresensi menyediakan sarana yang berguna untuk pengujian
epinefrin. lingkup pendekatan analitis ini terbatas, dalam stereoselektivitas yang tidak

dapat dicapai, sensitivitas dan gelar yang adil kekhususan analitis disediakan.
Sementara Alami katekolamin seperti epinefrin, norepinefrin, dopa, dan dopamin
memiliki fluoresensi asli. Semua senyawa ini maksimal pada 285 nm dan berpendar
di 325 nm. Sejak beberapa katekolamin yang terjadi dalam jaringan hidup memiliki
karakteristik dasarnya neon yang sama, fluoresensi asli tidak umum digunakan dalam
uji hormon tertentu atau senyawa dalam cairan tubuh atau jaringan. Aplikasi
fenomena ini, bagaimanapun, telah dilakukan untuk mengukur bentuk analisis.
Terutama karena fluoresensi epinefrin yang terjadi di kisaran ultraviolet, perlu ada
untuk analisis pendekatan yang akan menghasilkan fluoresensi di wilayah terlihat.
Dua skema umum berevolusi yaitu yang pertama melibatkan produksi hydroxyindole
berpendar dengan siklisasi oksidatif epinefrin dalam kondisi dasar. Yang kedua
melibatkan produksi quinoxaline berpendar. Seperti diamati oleh Loew, epinefrin
menghasilkan bahan yang berpendar ketika teroksidasi di lingkungan dasar air.
Penyelidikan awal menunjukkan bahwa uji epinefrin atas dasar ini adalah layak. Sifat
reaksi yang terlibat dalam memproduksi bahan berpendar dipelajari, dan ditetapkan
bahwa bahan berpendar yang dihasilkan adalah hydroxyindole dibentuk seperti
berikut :



Data dan Sistem Kromatografi
a. Kromatografi Lapis Tipis
Lapisan tipis dan kromatografi kertas telah digunakan secara luas untuk
analisis epinefrin dan senyawa adrenergik lainnya yang terkandung dalam

cairan tubuh atau formulasi farmasi. Seperti dibahas oleh Macek, beberapa
formasi spot adalah masalah yang cukup besar pada kedua kertas analisis
kromatografi lapis tipis epinefrin. Bintik tambahan kemungkin sebagai hasil
dari pembentukan migrasi diferensial dasar dan berbagai garam kompleks
yang terbentuk selama isolasi atau proses kromatografi atau, seperti yang
ditunjukkan oleh Roberts dan Broadley kemungkinan reaksi produk epinefrin
dengan adanya asam klorida.
Prosedur : Totolkan secara terpisah masing-masing 5 J.Ll

Larutan baku

epinefrin, Larutan baku norepinefrin dan Larutan uji pada lempeng
kromatografi siiika gel. Biarkan bercak mengering dan masukkan lempeng ke
dalam bejana kromatografi yang tidak dijenuhkan, berisi fase gerak campuran
n-butanol P-air-QSam format P (7:2:1) hingga merambat tiga per empat tinggi
lempeng. Angkat lempeng, biarkan mengering dalam aliran udara hangat.
Semprot dengan Folin-Ciocalteu-Fenol LP, kemudian dengan larutan natrium
karbonat P (1 dalam 10). Harga R1 bercak utama Larutan uji sesuai dengan
yang diperolen dari Larutan baku epinefrin. Bercak lain dari Larutan uji 6dak
lebih besar dan intensif dari bercak yang diperoleh dari Larutan baku
b.

norepinefrin.
Kromatografi Gas
Karena epinefrin adalah polar, baterai majemuk derivitization merupakan
persyaratan untuk analisis gas kromatografi. Sililasi telah ditemukan untuk
menjadi sarana yang berguna untuk mengubah epinefrin ke derivatif dengan
karakterisasi kromatografi gas yang cocok. Sen dan McGeer menemukan
bahwa turunan tersebut dapat diproduksi dengan memperlakukan epinefrin
dengan Hexamethyldisilazane (HMDS). Produk silylated ini ditandai dengan
Horning sebagai turunan N-trimetilsilil epinefrin. Horning lebih lanjut
menunjukkan bahwa preferensial 0-sililasi dapat dicapai dengan menggunakan
trimethylsilylimidazole (TMSI) dalam asetonitril. Dengan kondisi tersebut, Nsililasi tidak terjadi.
Berbagai kondisi kromatografi telah digunakan untuk kromatografi epinefrin
dan senyawa terkait. Kolom dikemas dengan fase cair seperti polimer siloksan
SE-30 atau methysiloxane polimer F-60 yang berguna. suhu yang tepat adalah

c.

170-220 ° C.
Kromatografi Cair Kerja Tinggi (KCKT)
Kromatografi kolom cair telah diterapkan pada analisis epinefrin dan
senyawa terkait. Karena hormon underivatized tidak mudah partisi ke dalam

cairan bercampur air, kromatografi kolom cair seperti terkait dengan epinefrin
biasanya dilakukan dengan menggunakan pertukaran ion resin atau adsorben.
Smith menerapkan kromatografi untuk analisis epinefrin yang mengandung
obat-obatan, digunakan tersulfonasi sebuah resin polistirena untuk menyerap
hormon dan HC1 air untuk elusi.
Higuchi menggunakan kromatografi partisi untuk menganalisis epinefrin
sebagai bagian dari kerja yang dilakukan pada reaksi epinefrin dan bisulfit.
Dalam hal ini hormon asetat untuk membuat lebih lipophillic. Prosedur
epinefrin dipisahkan dari produk degradasi. Fu dan Sibley mengembangkan
metode kromatografi cair efisiensi tinggi untuk epinefrin dalam formulasi
farmasi, menggunakan resin kolom tukar kation dan buffer fosfat berair
sebagai fase gerak. Metode ini memungkinkan pemisahan epinefrin dari
oksidatif dan produk degradasi lainnya menujukkan stabilitas, baru ini,
Holcomb mengembangkan metode untuk analisis Epinephrp Injeksi
menggunakan kromatografi pasangan-ion pada C18 Bondapak kolom. Fase
mobile yang digunakan adalah methano1: air (2: 3) yang mengandung EDTA,
asam asetat, dan dioktil natrium succinate. Meskipun kromatografi cair
efisiensi tinggi banyak digunakan, sangat sedikit data untuk epinefrin
ditemukan dalam literatur. Mungkin sebagai teknik berpasangan-ion
kromatografi menjadi lebih dikenal, akan ada aplikasi.



Isolasi

Sintet

Epinephrine disintesis melalui 4 tahap yaitu :
1. Produksi chloracetocaltechol
2. Konversi chloracetocaltechol menjadi adrenolone hydrochloride yang direaksikan
dengan methylamine
3. Pemurnian adrenolone hydrochloride di tahap 2 dan reduksi garam rasemat
epinephrine
4. penyelesaian rasemat yang dihasilkan untuk menghasilkan levo isomer yang
diinginkan umumnya dicapai dengan kristalisasi dari metanol sebagai tartrat.


Metode analisis yang pernah digunakan
1. Spektrofotometri
Epinefrin menyerap radiasi ultraviolet karena kehadiran dari catechol
chromophore. Selain itu

amina biogenic catechol ( norepinefrin ) dan tidak

diberlakukan yang berkaitan dengan epinefrin ( l- 3,4-dihydroxyphenyl -2methylaminoethane sulfonic ( asam ). likewide mengandung chromophore ini
mempunyai perbedaan oleh karena spektrum. Tions, timbul dari gangguan
spektrum karena adanya gangguan yang disebabkan dari bahan berwarna, yang

mungkin. Faktor-faktor ini membatasi aplikasi dari pengukuran ultraviolet
langsung dalam analisis adrenalin untuk kasus itu di mana tambahan informasi,
mengenai tidak adanya mengganggu bahan materi, adalah avail- .Complica lebih
lanjut yang mineral esdm dari 1n hc1 pembentuk asam ( HCl atau H2S04)
memiliki daya maksimum dekat 280 nm. Farmakope Inggris 110 menentukan
bahwa spektrum sinar ultraungu dari sampel yang diberikan menunjukkan
maksimum hanya mencapai panjang gelombang ini .Adrenalone , sebuah possible
process-related, adalah dan mengawasi mendeteksi oleh pengukuran w pada 310
(49,110) nm. Dalam hal ini tidak memiliki panjang gelombang epin- ephrine
signifikan tetapi penyerapan adrenelone menyerap
2. Kromatografi
Kromatografi lapis tipis dan kromatografi kertas telah digunakan secara luas
untuk analisis dari epinefrin dan senyawa lain adrenergic yang terkandung dalam
cairan tubuh atau formulasi farmasi. Yang mengkaji masalah ini dengan epinefrin
221 beberapa buku yang ditujukan untuk topik chromatography tion lapisan tipis
kertas, dan masih diberikan reagents vii di meja.Summaries chromatographic
detec- ( dari perilaku dan 82,831 Sebagaimana dibahas oleh macek ( 83 ),
beberapa tempat pembentukan adalah sebuah masalah con- siderable di kedua
kertas dan lapisan tipis chromato- analisis grafis dari epinefrin. Yang
mengakibatkan pembentukan dan diferensial bermigrasi dari garam berbagai
pangkalan kompleks yang bebas dan membentuk proses chromatographic dalam
isolasi atau yang, atau yang, seperti yang ditunjukan oleh robert broadley ( 49 ),
dan mungkin menjadi produk reaksi dari epinefrin dalam kehadiran asam klorida.



Formulasi
Formula umum untuk sediaan injeksi adalah sebagai beriku :
R/
Zat aktif
Pengisotonis
Pengawet
Antioksidan
Pelarut
Mengacu pada standar umum komposisi untuk sediaan injeksi makan formula injeksi
epinefrine adalah sebagai berikut :
R/
Epinefirne Bitrratas
Natrium Clorida
Natrium EDTA

1.8 mg
8 mg
1 mg

Clorbutanolum
Aqua Pro Injeksi
(Fornas 1978 hal 121)
-

1 mg
ad 1 ml

Monografi

1. CHLORBUTANOLUM
Klorbutanol

C4H7Cl3O.1/2H2O

BM = 186,5

Klorbutanol mengandung tidak kurang dari 98,0 % dan tidak lebih dari 101,0 %
C6H7Cl3O dihitung terhadap zat anhidrat.
Pemerian

: kristal putih atau hampir putih, tidak berwarna, mudah menyublim

Kelarutan : sedikit larut dalam air, sangat mudah larut dalam etanol 96 %, larut
dalam gliserol 85 %.
Keasaman : kedalam 4 mL larutan 50,0 % dalam etanol P tambahkan 15 mL
etanol P dan 0,1 mL bromtimol biru LP ; tidak lebih dari 0,1 mL
natrium hidroksida 0,1 M LV yang diperlukan untuk mengubah warna
larutan.
Stabilitas

: klorbutanol mudah menguap dan mudah menyublim, degradasi
larutan dikatalisis oleh ion hidroksida. Stabilitas yang baik pada pH 3
tetapi menjadi semakin buruk dengan meningkatnya pH.

(FI IV 1995 Hal 197)
(British Pharmacopoeia, 2009 vol I & II)
(HOPE)
2. Sodium Chlorida
NaCl

BM 58,44

Pemerian

: serbuk putih atau hampir putih, tidak berwarna.

Kelarutan

: larut dalam air, praktis tidak larut dalam etanol anhidrat.

Keasaman/kebasaan : pH 6,7-7,3 (larutan jenuh)

Stabilitas : larutan sodium klorida stabil tetapi dapat menyebabkan pemisahan
partikel dari jenis wadah tertentu. Larutan dapat disterilkan dengan
autoklaf atau filtrasi. Bahan padat stabil,dan harus disimpan dalam
wadah tertutup baik, ditempat yang kering dan sejuk.
(British Pharmacopea 2009 vol I & II)
(HOPE)
3. EDTA (Disodium Edetate)

C10H14N2Na2O8

BM = 336,2 (anhidrat)
372,2 (dihidrat)

Pemerian

: Kristal putih, tidak berbau, dengan rasa sedikit asam

Kelarutan

: praktis tidak larut dalam kloroform dan eter, sedikit larut dalam
etanol, larut dalam 1 : 11 bagian air.

Keasaman-kebasaan : pH 4,3-4,7 (1 % w/v larutan dalam karbon dioksida bebas air)
Stabilitas

: garam edetate lebih stabil daripada asam EDTA. Namun disodium
etetat dihidrat kehilangan kristal air jika dipanaskan sampai 120oC.
Larutan disodium edetat dapat disterilkan dengan autoklaf, dan harus
disimpan dalam wadah bebas alkali. Disodium edetat bersifat
higroskopis dan tidak stabil apabila terkena air. Maka harus disimpan
dalam wadah tertutup baik di tempat sejuk dan kering.

(HOPE)
4. Aqua Sterile Pro Injection
Air steril untuk injeksi adalah air untuk injeksi yang disterilkan dan dikemas
dengan cara yang sesuai. Tidak mengandung bahan antimikroba atau bahan tambahan
lainnya.
Pemerian

: cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau.

Endotoksin bakteri tidak boleh lebih dari 0,25 unit Endotoksin FI per ml,
menggunakan Endotoksin BPFI sebagai pembanding.
Sterilitas

: memenuhi syarat

Syarat lain

: memenuhi uji pH, sulfat, kalsium, karbondioksida dan logam berat
seperti yang tertera pada air murni.

(FI IV 1995, Hal : 112)
 Jenis Sediaan Lain
1. Epinefrin Inhalasi Aerosol
Definisi : Epinefrin Bitartrate inhalasi Aerosol adalah suspensi microfine epinefrin
bitartrat di propelan dalam wadah bertekanan. Ini berisi NLT 90,0% dan NMT 110,0%
dari jumlah berlabel epinefrin bitartrat (C9H13NO3.C4H6O6).
Identifikasi
A. Prosedur
Analisis : Tempat 10 mL air dalam gelas kecil, dan memberikan 3 semprotan
aerosol dari bawah permukaan air, actuating katup dengan menekan ujung
terhadap bagian bawah gelas. Filter, dan 5 ml filtrat tambahkan 1 tetes asam
klorida encer (1 di 120). Tambahkan o.5 mL 0,1 N yodium, diamkan selama 5
menit, dan tambahkan 1 mL 0,1 N natrium tiosulfat.
Kriteria penerimaan: Warna merah-cokelat menghasilkan
B. Prosedur
Analisis: menggerakkan katup dari Aerosol dengan menekan ujung terhadap
stasiun piring porselen white spot. Tutup tempat dengan 2 atau 3 tetes campuran 3
volume piridin dan 1 volume anhidrat asetat.
Kriteria penerimaan: Sebuah warna zamrud-hijau diproduksi.
Penetapan kadar logam
Prosedur
1. Larutan ferro-sitrat dan larutan Buffer: siapkan sesuai petunjuk di bawah uji
epinefrin (391)
2. Larutan Standar: siapkan sesuai petunjuk di bawah memberikan keseragaman
dosis di seluruh contens.
Larutan sampel : CATATAN: gelas spesimen yang cocok adalah salah satu
memiliki sebuah identation kecil yang terbentuk di permukaan bawah dalam
memiliki dimensi yang cukup untuk menerima batang aerosol vale selama aktuasi
sehingga mencegah jeratan partikel.

Tempatkan 20 mL kloroform dalam cocok 100 ml gelas. Perdana katup Epinefrin
Bitatrat inhalasi Aerosol dengan bergantian gemetar dan menembak 10 kali
melalui inhalasi aktuator lisan. Timbang aerosol, kocok, dan segera memberikan
semprotan tunggal di bawah permukaan kloroform, actuating katup dengan
menekan ujung ke identation di bawah gelas. Angkat Aerosol di atas permukaan
kloroform, dan kocok dengan lembut persiapan untuk memberikan semprotan lain
sama di bawah permukaan kloroform. Memberikan total 3 semprot dengan cara
ini. Bilas batang katup dan ferrule dengan 2 mL kloroform, mengumpulkan
pembilasan dengan spesimen dalam gelas. Biarkan aerosol kering, timbang, dan
menentukan berat total 3 semprot. Mentransfer solusi untuk tabung centrifuge
dengan bantuan dua 3 mL bagian choloform, dan tambahkan 10,0 ml baru
disiapkan larutan natrium bisulfit (1 di 500). Masukkan stopper, kocok kuat
selama 1 menit, centrifuge selama 5 menit, dan menggunakan supernatan yang
jelas sebagai solusi sampel.
Blanko : air
Kondisi Spektrometrik
Mode : UV-Vis
Panjang gelombang analitik : 530 nm
Cell : 1 cm
Analisis :
Sampel: solusi standar, larutan sampel, dan transfer Kosong 5.0 mL masingmasing larutan standar dan larutan sampel untuk memisahkan tabung reaksi.
Untuk setiap tabung menambahkan 100 uL Ferro-sitrat solusi dan 1,0 mL Buffer.
Hitung kuantitas, dalam persentase, dari C9H13NO3.C4H6O6 di setiap mL
Aerosol diambil:
Hasil = (Au/As) x (Cs/Cu) x d x 100
Au : Absorban larutan sampel
As : Absorban larutan standar
Cs : konsentrasi dari USP Epinefrin Bitartrat RS dalam larutan standar (µg/mL)
Cu : nominal konsentrasi dari larutan sampel (µg/mL)
d : berat jenis dari Aerosol (g/mL)
Densitas, d ditentukan sebagai berikut: Timbang volume dikenal (v) dari Aerosol
di jarum suntik 5 ml gas-ketat sesuai dilengkapi dengan katup linier. Kalibrasi
volume jarum suntik dengan mengisi ke 5 mL tandai dengan

dichlorotetrafluoroethane ditarik dari botol kaca berlapis plastik disegel dengan
neoprene beberapa dosis karet stopper dan segel alumunium, dengan
menggunakan 1,456 g / mL sebagai kepadatan cairan kalibrasi. Menjaga
dichlorotetrafluoroethane, sampel aerosol, dan jarum suntik (dilindungi dari
menjadi basah) pada 250 dalam bak air. Mendapatkan sampel, setara dengan
volume yang sama dengan yang diperoleh selama prosedur pengambilan sampel,
dari septum karet diganti terlibat dalam benang piring di salah satu ujung pas,
ujung threaded yang berisi tabung tajam mampu menusuk wadah aerosol , dan
gasket karet di sekitar tabung untuk merekam berat volume (v) dari Aerosol
sebagai w, dan menghitung kepadatan dengan rumus w v /.
Kriteria diterima : 90.0 %-110.0 %
Uji Kinerja
Larutan sampel : debit minimum yang disarankan dosis ke aparat sampling dan
melepaskan inhaler seperti yang diarahkan. Bilas aparat (filter dan interior)
dengan empat 5.0-mL ramuan larutan natrium bisulfat baru disiapkan (1 di 500),
dan transfer solusi yang dihasilkan secara kuantitatif ke 50 mL centrifuge tabung.
Tambahkan 10 mL kloroform, masukkan stpper itu, kocok kuat selama 1 menit,
dan centrifuge selama 5 menit. menggunakan supernatan yang jelas seperti yang
diarahkan dalam analisis.
Blanko : air
Spectrometric conditions
Mode : UV-Vis
Panjang gelombang analitik : 530 nm
Cell : 5 cm
Analisis :
Sampel : Larutan standar, larutan sampel, dan Kosong menjadi tiga termos
terpisah, mentransfer solusi Contoh, dan 20,0 mL Kosong. Untuk masing-masing
labu menambahkan 100 uL Ferro-sitrat solusi dan 1,0 mL Buffer solusi.
Hitung kuantitas, dalam ug C9H13NO3.C4H6O6 terkandung dalam dosis
minimum diambil:
Result = (Au/As) x Cs x V x N
Au = absorban larutan sampel
As = absorban larutan standar
Cs = konsentrasi dari USP Epinefrin Bitartrat RS dalam larutan standar (µg/mL)

V = volume larutan natrium bisulfat digunakan untuk menyiapkan larutan sampel
N = jumlah semprotan discharched untuk mendapatkan minimum dosis yang
disarankan
Tes spesifik


Ukuran partikel
Katup utama dari Aerosol dengan kocokan bergantian dan menembak
beberapa kali melalui oral inhalasi aktuator, dan kemudian menggerakkan satu
diukur semprot menjadi bersih, kering slide mikroskop diadakan 5 cm dari
ujung aktuator thr, tegak lurus dengan arah semprotan . Hati-hati bilas slide
dengan sekitar 2 mL karbon tetraklorida, dan biarkan kering. Periksa slide di
bawah mikroskop, dilengkapi dengan mikrometer okular dikalibrasi,
menggunakan 450 x pembesaran. Fokus pada partikel 25 bidang pandang
dekat pusat pola pengujian spesimen, dan perhatikan ukuran sebagian besar
partikel individu: mereka kurang dari 5 m panjang diukur sepanjang sumbu
terpanjang.
Kriteria diterima : NMT 10
Persyaratan tambahan




Kemasan dan penyimpanan: melestarikan di kecil, tidak reaktif, cahaya tahan
kontainer aerosol dilengkapi dengan katup meteran-dosis dan dilengkapi
dengan aktuator inhalasi oral.
Standar Referensi USP (11)
USP Epinephrine Bitartrate RS

2. Epinephrine Bitartrate Opthalmic Solution
Definisi :
Larutan optalmik Epinefrin Bitartrat adalah steril, buffer, larutan encer dari Epinefrin
Bitartrat. Ini berisi sejumlah Epinefrin bitartrat setara dengan 90,0% NLT dan NMT
115% dari jumlah berlabel epinefrin (C9H13NO3). Ini berisi agen antibakteri yang
sesuai dan dapat mengandung pengawet yang cocok.
Identifikasi
Prosedur
Analisis : sampai 5 ml pH 4.0 buffer asam ftalat (lihat reagen, indikator, dan solusi
solusi-buffer) tambahkan 0,5 mL 0,1 N iodin, dan memungkinkan untuk didiamkan
selama 5 menit. tambahkan 2 mL larutan natrium tiosulfat (1 dari 4).
Kriteria penerimaan: dihasilkan warna merah tua

Pengujian kadar logam

Prosedur
Larutan A : 6,8 mg / mL monobasa kalium fosfat dan 1,1 mg / mL natrium 1octanesulfonate. Atur larutan dengan asam fosfat dengan pH 2,5 ± 0,1.
Fase gerak : Asetonitril dan larutan A (3:17)
Larutan standar : 0.1 mg/mL dari USP Epinephrine Bitartrate RS
Larutan sampel : Setara dengan 0,1 mg / mL Epinefrin bitartrat dari volume larutan
optalmik dalam air.
Catatan-Volume larutan optalmik adalah baru saja dicampur dan bebas dari
gelembung udara
sistem kromatografi
(lihat kromatografi (621), kesesuaian sistem)
Mode
: LC
Detector
: UV 280 nms
Colom
: 3,2 mm x 25 cm; kemasan L1
Laju alir
: 1 mL / menit
Ukuran Injeksi
: 50 uL
Sistem kesesuaian
Sampel
: larutan standar
Persyaratan kesesuaian
Efisiensi Kolom
: NLT 2000 pelat teoritis, puncak analit
Faktor tailing NMT 2,5, puncak analit
Relatif standar deviasi: NMT 2,0%
Analisis
Sampel: larutan standar dan larutan sampel menghitung persen klaim label C 9H13NO3
dalam larutan optalmik diambil:
Result = (ru/rs) x (Cs/Cu) x (Mr1/Mr2) x 100
Ru : respon puncak dari larutan sampel
Rs : respon puncak dari larutan standar
Cs : konsentrasi USP Epinephrine Bitartrate RS dalam larutan standar (mg/mL)
Cu : nominal konsentrasi dari larutan sampel (mg/mL)
Mr1 : bobot molekul epinephrine, 183.20
Mr2 : bobot molekul dari epinephrine bitartrate, 333.29
Kriteria penerimaan : 90.0 % - 115 %
Test spesifik



pH (791) 3.0-3.8
Warna dan kejelasan

Larutan standar : Transfer 2 ml 0.100 N iodin vs ke 500 mL labu ukur dan
encerkan dengan air untuk volume.
Larutan sampel : Larutan optalmik
Analisis: visual memeriksa sebagian dari larutan sampel dalam tabung reaksi kaca
bening yang sesuai dengan latar belakang putih: tidak merah muda dan tidak
mengandung endapan. Jika ada warna kuning diamati dalam larutan sampel,
bersamaan menentukan absorbansi larutan sampel dan larutan standar dalam sel 1-cm
dengan spektrofotometer cocok ditetapkan pada 460 nm.
Kriteria penerimaan: absorbansi dosis larutan sampel tidak melebihi dari larutan
standar.
Tes sterilitas (71): memenuhi persyaratan
Persyaratan tambahan
 Kemasan dan penyimpanan: mempertahankan di kecil, baik diisi, ketat,
wadah tahan cahaya.
 Pelabelan: etiket menunjukkan bahwa larutan optalmik tidak boleh digunakan
jika warna adalah merah muda atau lebih gelap dari kuning muda atau jika
mengandung endapan.
 USP Reference Standards (11)
USP Epinephrine Bitartrate RS

SEDIAAN FARMASI
Epinephrine

Spektro UV dan IR ( Uv and IR Spectra, 2002)

Epinephrine pada pelarut methanol absorbsi maksimumnya pada panjang gelombang 282 nm,
dan pada 0,1 M Hcl absorbsi maksimumnya pada panjang gelombang 282 nm.

- Spectrum serapan UV (Florey, 1978).
Epinefrin dilaporkan (8, 9) memiliki karakteristik penyerapan ultraviolet berikut dalam air :

-

Spectrum serapan Inframerah
spectrum inframerah ephinefrin dapat dilihat pada gambar.1

-

Spectrum massa
Spektrum massa epinefrin (l0) seperti yang diperoleh pada spektrometer massa
dengan energi berkas elektron dari 70 eV menggunakan sistem inlet langsung yang
dipanaskan. dapat dilihat pada Gambar 2. Epinefrin memiliki 2 gugus hidroksil
fenolik yang dapat memberikan Ion molekul yang terlihat di spektrum massa. Puncak
100% (m / e = 44) muncul dari pembelahan B dengan produksi CH2NH3 + ion.
dengan spektroskopi massa sulfonil 1- dimethylamino-5-naftalena (dansil) derivatif .

-

Metode analisis (Florey, 1978)
1. Fluorometric
Pengukuran fluoresensi menyediakan sarana yang berguna untuk
pengujian

epinefrin.

lingkup

pendekatan

analitis

ini

terbatas,

dalam

stereoselektivitas yang tidak dapat dicapai, sensitivitas dan gelar yang adil
kekhususan analitis disediakan. Sementara Alami katekolamin seperti epinefrin,
norepinefrin, dopa, dan dopamin memiliki fluoresensi asli. Semua senyawa ini
maksimal pada 285 nm dan berpendar di 325 nm. Sejak beberapa katekolamin
yang terjadi dalam jaringan hidup memiliki karakteristik dasarnya neon yang
sama, fluoresensi asli tidak umum digunakan dalam uji hormon tertentu atau
senyawa dalam cairan tubuh atau jaringan. Aplikasi fenomena ini, bagaimanapun,
telah dilakukan untuk mengukur bentuk analisis.
Terutama karena fluoresensi epinefrin yang terjadi di kisaran ultraviolet,
perlu ada untuk analisis pendekatan yang akan menghasilkan fluoresensi di
wilayah terlihat. Dua skema umum berevolusi yaitu yang pertama melibatkan
produksi hydroxyindole berpendar dengan siklisasi oksidatif epinefrin dalam
kondisi dasar. Yang kedua melibatkan produksi quinoxaline berpendar. Seperti
diamati oleh Loew, epinefrin menghasilkan bahan yang berpendar ketika
teroksidasi di lingkungan dasar air. Penyelidikan awal menunjukkan bahwa uji
epinefrin atas dasar ini adalah layak. Sifat reaksi yang terlibat dalam memproduksi
bahan berpendar dipelajari, dan ditetapkan bahwa bahan berpendar yang
dihasilkan adalah hydroxyindole dibentuk seperti berikut :

2. kolorimetri

Prosedur kolorimetri yang telah diterapkan pada analisis epinefrin didasarkan
oleh adanya kelompok katekol atau fenolik dan karenanya memiliki tingkat
selektivitas variabel. Beberapa prosedur kolorimetri baru-baru ini dikembangkan
dengan cukup selektif, namun karena tidak ada yang stereoselektif, aplikasi
mereka terbatas pada situasi situasi tertentu di mana komposisi enantiomorphic
ditentukan secara independen atau kurang kuat d-isomer diketahui absen. Sumber
umum lainnya gangguan analitis termasuk katekolamin biogenik (norepinefrin)
dan produk tersulfonasi yang dihasilkan dari reaksi bisulfit dan epinefrin.
Prosedur kolorimetri untuk epinefrin menunjukkan bahwa bahan berwarna
dapat dihasilkan dari hormon ini dengan oksidasi dengan kalium persulfat.
Prosedur ini dikonfirmasi oleh Rees dan terbukti memberikan hasil yang sesuai
dengan farmakologi. Rincian prosedur ini diberikan dalam teks Garratt pada
analisis kuantitatif obat. Oksidator lainnya seperti yodium telah digunakan untuk
menghasilkan produk berwarna dan memberikan diferensiasi antara epinefrin dan
norepinefrin dalam sampel biologis. Satu komplikasi yang timbul dalam oksidasi
skema kolorimetri analitis yaitu diketahui bahwa bisulfit mengganggu. Metode
Doty itu yang mempekerjakan ion besi untuk menghasilkan warna berupaya
dengan masalah ini dalam arti gangguan
dari anion yang timbul dari asam sulfur tidak lagi jelas, Namun epinefrin sulfonat
dapat mengganggu. Yang lebih baru-baru ini pendekatan untuk penentuan
kolorimetri epinefrin melibatkan reaksi Thiosemicarbazide dengan kondisi dasar
bawah epinefrin. Di bawah kondisi prosedur ini, terlihat hanya katekol yang
menghasilkan produk berwarna..
Reaksi warna yang memproduksi epinefrin dikenal berguna untuk beberapa
identifikasi Hormon (SO), sementara yang lain berfungsi sebagai alat pendeteksi
dikertas dan kromatografi lapis tipis.
3. Polarimetrik
Metode yang melibatkan pengukuran rotasi optik telah diusulkan dan
digunakan untuk assay epinefrin dalam bentuk sediaan. Beberapa faktor yang
membatasi aplikasi langsung metode polarimetrik dan mengharuskan mereka
digunakan dan hubungannya dengan prosedur lainnya. Sebuah pertimbangan
utama dalam hal ini adalah bahwa hilangnya kegiatan dibidang optik dapat
dikaitkan dengan baik lengkap atau hanya hilangnya sebagian aktivitas
farmakologis.
4. Titrimetri

Epinefrin dapat dititrasi menggunakan sistem berair. Biasanya titrasi
dilakukan dalam asam asetat glasial menggunakan asam perklorat sebagai titran
dan kristal violet sebagai indikator. Kemurnian epinefrin massal dan epinephrine
tartrat U.S.P. didirikan dengan cara ini. Prosedur mikrotitrasi fotometri dan
terapan telah dikembangkan.
5. Kromatografi
a. Lapis tipis dan Kertas
Lapisan tipis dan kromatografi kertas telah digunakan secara luas
untuk analisis epinefrin dan senyawa adrenergik lainnya yang terkandung
dalam cairan tubuh atau formulasi farmasi. Seperti dibahas oleh Macek,
beberapa formasi spot adalah masalah yang cukup besar pada kedua kertas
analisis kromatografi lapis tipis epinefrin. Bintik tambahan kemungkin sebagai
hasil dari pembentukan migrasi diferensial dasar dan berbagai garam
kompleks yang terbentuk selama isolasi atau proses kromatografi atau, seperti
yang ditunjukkan oleh Roberts dan Broadley kemungkinan reaksi produk
epinefrin dengan adanya asam klorida.
6. Kromatografi gas
Karena epinefrin adalah polar, baterai majemuk derivitization merupakan
persyaratan untuk analisis gas kromatografi. Sililasi telah ditemukan untuk
menjadi sarana yang berguna untuk mengubah epinefrin ke derivatif dengan
karakterisasi kromatografi gas yang cocok. Sen dan McGeer menemukan bahwa
turunan tersebut dapat diproduksi dengan memperlakukan epinefrin dengan
Hexamethyldisilazane (HMDS). Produk silylated ini ditandai dengan Horning
sebagai turunan N-trimetilsilil epinefrin. Horning lebih lanjut menunjukkan
bahwa

preferensial

0-sililasi

dapat

dicapai

dengan

menggunakan

trimethylsilylimidazole (TMSI) dalam asetonitril. Dengan kondisi tersebut, Nsililasi tidak terjadi.
Berbagai kondisi kromatografi telah digunakan untuk kromatografi epinefrin
dan senyawa terkait. Kolom dikemas dengan fase cair seperti polimer siloksan
SE-30 atau methysiloxane polimer F-60 yang berguna. suhu yang tepat adalah
170-220 ° C.
7. Kromatografi Kolom Cair
Kromatografi kolom cair telah diterapkan pada analisis epinefrin dan senyawa
terkait. Karena hormon underivatized tidak mudah partisi ke dalam cairan

bercampur air, kromatografi kolom cair seperti terkait dengan epinefrin biasanya
dilakukan dengan menggunakan pertukaran ion resin atau adsorben.
Smith menerapkan kromatografi untuk analisis epinefrin yang mengandung
obat-obatan, digunakan tersulfonasi sebuah resin polistirena untuk menyerap
hormon dan HC1 air untuk elusi.
Higuchi menggunakan kromatografi partisi untuk menganalisis epinefrin
sebagai bagian dari kerja yang dilakukan pada reaksi epinefrin dan bisulfit.
Dalam hal ini hormon asetat untuk membuat lebih lipophillic. Prosedur epinefrin
dipisahkan dari produk degradasi. Fu dan Sibley mengembangkan metode
kromatografi cair efisiensi tinggi untuk epinefrin dalam formulasi farmasi,
menggunakan resin kolom tukar kation dan buffer fosfat berair sebagai fase
gerak. Metode ini memungkinkan pemisahan epinefrin dari oksidatif dan produk
degradasi lainnya menujukkan stabilitas, baru ini, Holcomb mengembangkan
metode untuk analisis Epinephrp Injeksi menggunakan kromatografi pasanganion pada C18 Bondapak kolom. Fase mobile yang digunakan adalah methano1:
air (2: 3) yang mengandung EDTA, asam asetat, dan dioktil natrium succinate.
Meskipun kromatografi cair efisiensi tinggi banyak digunakan, sangat sedikit
data untuk epinefrin ditemukan dalam literatur. Mungkin sebagai teknik
berpasangan-ion kromatografi menjadi lebih dikenal, akan ada aplikasi.
8. spektrofotometri
Analisis epinefrin melalui pengukuran spektrofotometri langsung tunduk pada
banyak pertimbangan yang sama seperti analisis kolorimetri hormon. Epinefrin
menyerap radiasi ultraviolet karena kehadiran katekol kromofor. Amina biogenik
katekol terkait lainnya (norepinefrin) dan senyawa aktif yang terkait dengan
epinephrine (l- (3,4-dihydroxyphenyl) -2-metil aminoetan asam sulfonat, depinefrin, dll) juga mengandung kromofor dan karena itu memiliki spektrum
yang sama. Komplikasi yang timbul dari gangguan spektral karena kehadiran
bahan

berwarna,

kemungkinan

Faktor-faktor

ini

membatasi

penerapan

pengukuran ultraviolet langsung dalam analisis epinefrin untuk kasus-kasus di
mana informasi tambahan, mengenai tidak adanya bahan mengganggu, tersedia
komplikasi lanjut.
Dalam asam mineral 1N (HC1 atau H2S04), epinefrin memiliki maksimum
penyerapan dekat 280 nm. The Pharmacopia Inggris menetapkan bahwa
spektrum ultraviolet dari sampel yang diberikan maksimal hanya pada panjang
gelombang ini. Adrenalin, kemungkinan proses pengotor terkait, terdeteksi dan

dipantau oleh pengukuran W pada 310 nm. Pada panjang gelombang epinefrin ini
tidak memiliki daya serap yang signifikan tetapi adrenalin menyerap maksimal.
B. Epinephrine Bitartrat / Epinephrine Acid Tartrate (British Pharmacopoeia 2009)
- zat terkait
Kromatografi cair. Siapkan tempat terlindung dari cahaya. Pelarut campuran A,
Larutkan 5,0 g kalium dihidrogen fosfat Rand kemudian 2,6 g natrium octanesulphonate
Rin air untuk kromatografi R, dan encerkan sampai 1000 ml dengan pelarut yang sama
(biasanya diperlukan pengadukan setidaknya selama 30 menit) untuk mencapai
pembubaran lengkap. Sesuaikan dengan pH 2.8 dengan asam fosfat R. Pelarut campuran B
asetonitril R1, pelarut campuran A (130: 870 V / V).
Uji kelarutan, 75 mg zat yang akan diperiksa dalam 5 ml 0,1 M klorida acidand
encerkan sampai 50 ml dengan pelarut campuran B. Solusi referensi (a) Encerkan 1,0 ml
larutan uji untuk 100,0 ml dengan pelarut campuran B. Encerkan 1,0 ml larutan ini
menjadi 10,0 ml dengan pelarut campuran B. Solusi referensi (b) Larutkan 1,5 mg
noradrenalin tartrat CRS (pengotor B) dan 1,5 mg dari adrenalone hidroklorida R
(pengotor C) dalam pelarut campuran B, tambahkan 1,0 ml larutan uji dan encerkan
sampai 100,0 ml dengan pelarut campuran B. Solusi referensi (c) larutkan isi botol
adrenalin pengotor CRS campuran (kotoran D) dan E dalam 0,1 ml 0,1 M klorida acidand
0,9 ml pelarut campuran B. Solusi referensi (d) larutkan 7,5 mg adrenalin tartrat dengan A
CRSin 0,5 ml 0,1 M asam klorida diencerkan sampai 5.0 ml dengan pelarut campuran B.
Larutan blanko 0,1 asam klorida M, pelarut campuran B? (1: 9 V/ V).
Kolom
size: l = 0,10 m, Ø = 4,6 mm;
Fase stasioner: end-capped octadecylsilyl silica gel untuk kromatografi R (3 m Suhu: 50 °
C).
Fase gerak :
fase gerak A: asetonitril R1, pelarut campuran A (5:95 V / V)
fasa bergerak B: asetonitril R1, pelarut campuran A (45:55 V / V)

-

Laju alir: 2,0 ml/ menit
Deteksi : Spectrophotometer pada 210 nm.
Injeksi 20 ml.
Identifikasi pengotor: Gunakan kromatogram disertakan dengan campuran adrenalin
pengotor CRS dan kromatogram yang diperoleh dengan larutan acuan (c ) untuk
mengidentifikasi puncak karena pengotoran D dan E, menggunakan kromatogram
disertakan dengan adrenalin tartrat dengan kenajisan A CRS dan kromatogram yang

-

diperoleh dengan larutan acuan (d) untuk mengidentifikasi puncak karena pengotor A.
Retensi relative : Dengan mengacu adrenalin.
Identifikasi epinephrine bitartrat ( farmakope IV,
ldentifikasi Larutkan lebih kurang 500 mg dalam 20 ml air yang mengandung lebih
kurang 100 mg natri11m b!sulfit P. Tambahkan amonium hidroksida 6 N hingga
larutan berbau amoniak dan dinginkan dalam lemari pendingin selama 1 jam. Sating
endapan, cuci 3 kali tiap kali dengan 2 ml air dingin, kemudian dengan 5 ml etanol P
dingin dan terakhir dengan 5 ml eter P dingin, keringkan dalam hampa udara di atas
silika gel P selama 3 jam. Epinefrin yang dihasilkan memenuhi Identifikasi berikut.
A. Pada 5 ml Dapar Jtalat pH 4,0, tambahkan 0,5 ml larutan agak asam epinefrin yang
dihasilkan (1 dalam 1000) dan 1,0 ml iodum 0,1 N, biarkan selama 5 menit,
tambahkan 2 ml larutan natrium tiosulfat P (1 dalam 40): terjadi wama merah tua.
B. Rotasi jenis antara -50° dan -53,5°; lakukan penetapan seperti yang tertera pada
Penetapan Rotasi Optik dan Rotasi fenis <1091> menggunakan 200 mg epinefrin
yang ditimbang seksama, dan dilarutkan dalam larutan asam klorida P (1 dalam 20)
hingga 10,0 mi, Jarak lebur <1021> Antara 147° dan 152°, disertai peruraian. Susut
pengeringan <1121> Tidak lebih dari 0,5%, lakukan pengeringan dalam hampa udara
di atas silika gel P selama 3 jam. Sisa pemijaran <301> Dapat diabaikan; lakukan
penetapan menggunakan 100 mg. Adrenalon Daya serap pada panjang gelombang 310
nm tidak lebih dari 0,2; lakukan penetapan seperti yang tertera pada Spektrofotometri
dan Hamburan Cahaya <1191> menggunakan larutan dalam asam Tclorida P (1 dalam
200) yang mengandung 4 mg per ml. Norepinefrin bitartrat lidak lebih dari 4,0%.
Larutan baku epinefrin Timbang saksama sejuinlah Epinefrin Bitartrat BPFJ, larutkan
dalam air hingga 352 Ergocalciferolum I Monografi kadar lebih kurang 200 mg per

ml. Pipet sejumlah volume larutan ini, encerkan dengan metanol P hingga kadar lebih
kurang 20 mg per ml. -Larutan baku norepinefrin Timbang saksama sejumlah
Norepinefrin Bitartrat BPFI, larutkan dalam air hingga kadar lebih kurang 8,0 mg per
ml. Pipet sejumlah volume larutan ini, encerkan dengan metanol P hingga kadar lebih
kurang 0,8 mg per ml. Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 200 mg larutkan
dalam 1,0 ml air dan encerkan dengan
metanol P hingga 10,0 ml.
-KLT
Prosedur Lakukan Kromatografi Lapis Tipis seperti yang tertera pada
Kromatografi <931>. Totolkan secara terpisah masing-masing 5 J.Ll Larutan baku
epinefrin, Larutan baku norepinefrin dan Larutan uji pada lempeng kromatografi
siiika gel. Biarkan bercak mengering dan masukkan lempeng ke dalam bejana
kromatografi yang tidak dijenuhkan, berisi fase gerak campuran n-butanol P-airQSam format P (7:2:1) hingga merambat tiga per empat tinggi lempeng. Angkat
lempeng, biarkan mengering dalam aliran udara hangat. Semprot dengan FolinCiocalteu-Fenol LP, kemudian dengan larutan natrium karbonat P (1 dalam 10). Harga
R1 bercak utama Larutan uji sesuai dengan yang diperolen dari Larutan baku
epinefrin. Bercak lain dari Larutan uji 6dak lebih besar dan intensif dari bercak yang
diperoleh dari Larutan baku norepinefrin.

Sponsor Documents

Or use your account on DocShare.tips

Hide

Forgot your password?

Or register your new account on DocShare.tips

Hide

Lost your password? Please enter your email address. You will receive a link to create a new password.

Back to log-in

Close